分子生物学(考点)

名词解释：*顺反子假说（Theory of cistron）：顺反子是基因的同义词在一个顺反子内，有若干个突变单位——突变子，有若干个交换单位——交换子基因是一个具有特定功能的，完整的，不可分割的最小的遗传单位 *C 值矛盾：从总体上说，生物基因组的大小同生物在进化上所处地位的高低没有绝对的相关性，这种现象称为 C 值矛盾*间隔基因：即真核生物的结构基因是由若干外显子和内含子序列相间隔排列组成的间隔基因跳跃基因(Jumping gene, 或叫转座子-Transposon, Tn)：能发生转座的独立的遗传结构单位*DNA 半保留复制：复制过程中亲代 DNA 的双链分子彼此分离，作为模板，按 AT 配对，CG 配对的原则，合成两条新生子链的复制方式半不连续复制：DNA 复制时，前导链按 DUMP 片段以连续复制的方式完成子代 DNA 的合成，后随链以不连续复制的方式完成冈崎片段的合成冈崎片段：在脉冲标记实验中最初合成的 10~20s 片段DNA 复制的转录激活：前导链的 RNA 引物是由 RNA 聚合酶合成的，如同基因转录过程一样，RNA聚合酶可以使双链 DNA 分子的局部开链，在合成 10~12 个核苷酸的 RNA 片段之后，再由 DNA 聚合酶完成前导链 DNA 的合成，在完成近 1000~2000 个核苷酸的 DNA 合成后，后随链才在引发酶的作用下开始启动冈崎片段的引物 RNA 的合成，所以将这一过程也称为 DNA 复制的转录激活。

位置效应：基因的功能不仅决定于它的自身结构和剂量，也决定于它所在的位置及其与邻近基因间的相互联系顺反子（Cistron）：是基因的同义词，即染色体上的一个区段全同等位基因：在同一基因座位中，同一突变位点，向不同方向发生突变所形成的等位基因非全同等位基因：在同一基因座位中，不同突变位点与突变所形成的等位基因顺式作用元件（cis action factor）：存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，它们的作用是参与基因表达的调控反式作用因子 (trans action factor)：是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质有时也称转录因子增色效应：随温度升高单链状态的 DNA 分子不断增加而表现出值递增的效应减色效应：变性 DNA 复性形成双螺旋结构后，其 260nm 紫外吸收会降低的现象复性动力学复杂性 K.C：最长的没有重复序列的核苷酸序列数正超螺旋：当向右旋 B-DNA 分子施右旋外力，使双螺旋体的局部更趋紧缩，每一螺旋的核苷酸对数小于 10.5，则 DNA 会出现向左旋转的超螺旋结构，也称为正超螺旋。

负超螺旋：当向右旋 B-DNA 分子施左旋外力，使双螺旋体的局部趋向松弛，每一螺旋的核苷酸对数大于 10.5，则 DNA 会出现向右旋转的超螺旋结构，也称为负超螺旋C 值：某生物单倍体基因组 DNA 的核苷酸数定义为大 C 值，将受中心法则限定，编码基因信息的总DNA 含量定义为小 c 值重复基因：指染色体上存在多数拷贝基因重叠基因：不同的基因共用一段相同的 DNA 序列转座：细菌病毒和真核细胞的染色体上合有一段可在基因组中移动的 DNA 片段，这种转移称为转座假基因：具有与功能基因相似的序列，但不能翻译有功能蛋白质的无功能基因 DNA 复制: 亲代双链 DNA 分子在 DNA 聚合酶等相关酶的作用下，分别以每条单链 DNA 分子为模板，聚合与模板链碱基可以互补配对的游离的三磷酸脱氧核糖核酸 dNTP，合成出两条与亲代 DNA 分子完全相同的子代双链 DNA 分子的过程复制子（Replicon）：从复制起点到复制终点的 DNA 区段dUMP 片段： 前导链合成的初期过程中，约 1200 个核苷酸就有一个 dUMP 被切除的可能，在 Ap 内切酶未完成作用前提取 DNA 并进行变性分析，得到的与冈崎片段相似大小的 1000~2000 核苷酸的片段。

端粒：在染色体末端具有的一种对维持染色体的稳定起着十分重要的作用的特殊结构 端粒酶：从四膜虫中分离并纯化到相对分子质量为 2.0×～5.0×与端粒序列合成有关的酶，也叫做端粒转移酶转录：是在 RNA 聚合酶作用下，以双链 DNA 中的一条单链作为转录的模板，按 A=U 和 G≡C 配对的原则合成 RNA 的过程启动子：指能被 RNA 聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段 DNA 序列NusA 蛋白：阻止终止子发生作用使 RNA 聚合酶越过终止子，继续转录的一类终止因子的蛋白质它是一种可以与 RNA 聚合酶结合的识别终止子的特殊辅助因子增强子：能强化转录起始的一段 DNA 序列为增强子或强化子，指增加同它连锁的基因转录频率的DNA 序列增强子是通过启动子来增加转录的沉默子：一种通过一段延伸的 DNA 区域影响染色质结构, 从而调节转录关闭的 DNA 元件绝缘子：一段具有特色染色质结构的区域，能阻断增强子和沉默子的一段 DNA 序列RNP （核糖核蛋白）：指包含有 RNA 的核蛋白，即将核酸和蛋白质结合在一起的一种形式核糖核蛋白包括核糖体、端粒酶以及小核 RNA同工受体 tRNA：能解读同义密码子的不同 tRNA 被定义为同工受体 tRNA。

SD 序列: mRNA 中用于结合原核生物核糖体的序列SD 序列在细菌 mRNA 起始密码子 AUG 上游 7-12 个核苷酸处，有一段富含嘌呤的碱基序列，能与细菌 16SrRNA3’端识别，帮助从起始 AUG 处开始翻译Kozak 规则:由起始复合物扫描翻译起始密码的信号是一段包含有 AUG 的保守序列“ACCAUGG” ，这一序列也被称为 Kozak 序列开放阅读框（ORF）是基因序列中的一段无终止序列打断的碱基序列，可编码相应的蛋白阅读框：解读 mRNA 中遗传密码的不同的 tRNA.密码子家族（codon family）: 在密码子中，前两个碱基相同，并且编码同一种氨基酸的密码子广义密码子（GGC) / 密码中的密码: 密码子中第二个核苷酸决定氨基酸性质、蛋白质空间结构及密码子和反密码子之间缔合能的特点即为广义密码（GGC）氨酰 tRNA 合成酶（ AARS）:是生物体内蛋白质合成过程中的一类关键酶，能专一性辨认氨基酸的侧链和 tRNA，催化特定氨基酸与特异 tRNA 结合，使 mRNA 的遗传信息准确无误地反映在蛋白质氨基酸序列上副密码子（Paracodon）：tRNA 中决定负载特定氨基酸的空间密码。

双筛作用: 指 AARS（氨酰 tRNA 合成酶）的氨基酸结合位点上的“结合位点” （binding site 或活性位点，activation site）和水解位点（hydrolytic site 或编辑位点，editing site）的两个功能域，并由此形成“两个不同筛孔的筛板”结构组成型表达：指不大受环境变动而变化的一类基因表达适应性表达：指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达操纵子：是基因表达的协调单位，由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成操纵基因受调节基因产物的控制结构基因：是决定合成某一种蛋白质分子结构相应的一段 DNA结构基因的功能是把携带的遗传信息转录给 mRNA（信使核糖核酸）,再以 mRNA 为模板合成具有特定氨基酸序列的蛋白质操纵基因：位于结构基因的一端，是操纵结构基因的基因当操作基因“开动” 时,处于同一染色体上的，由它所控制的结构基因就开始转录、翻译和合成蛋白质当“关闭” 时，结构基因就停止转录与翻译弱化子(attenuator)：原核生物操纵子中能显著减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列，该区域能形成不同的二级结构，利用原核微生物转录与翻译的偶联机制对转录进行调节密码子的简并性：一种氨基酸由几个密码子所编码的现象自主复制序列：富含 AT 碱基并在不同复制子中较为保守的序列特异性诱导转录：是指可以接受外在信号调节的转录启动子：指 DNA 分子上被 RNA 聚合酶，转录因子等识别并结合行成转录起始复合物的区域。

起始氨基酸:蛋白质合成开始的第一个氨基酸RNA 的剪接:将真核生物的间隔基因内部的内含子检出，同时将外显子连接起来行成成熟 RNA 分子的过程编码链:双链 DNA 分子中的非模板链RNA 加工:新结合的 RNA 分子所经历的结构和化学方面的修饰与成熟过程复性:已经发生变性的 DNA 溶液在逐渐降温的条件下，两条核苷酸链的配对碱基又重新行成氢键，恢复到天然 DNA 的双螺旋结构简答题：*1、DNA 变性过程的表现？（粘度、沉降速度、紫外吸收光值）①S.S.DNA 粘度降低②S.S.DNA 沉降速度加快 ③S.S.DNA 分子的 nmUV 值上升*2.理解超螺旋发生规律（L=T+W ）,理解 L、T、W 的概念，各种情况都会计算W：DNA 形成的超螺旋数 L：DNA 双链分子的交叉数 T：DNA 分子的初级螺旋数*3、为什么 DNA 复制时新生 DNA 链按 5'-3'方向延伸？①不管是哪种聚合酶它们都不能自己首先发动 DNA 的复制过程，只能利用引物分子提供的 3′-OH 末端聚合 dNTP，所以新生单链 DNA 分子的延伸方向只能是 5′→3′，这也是生物进化过程中“经济节能，适应生存”的结果。

②如果 DNA 链的延伸方向为 3'-5'，则必须切除 5'端两个磷酸基团以消除 dNTP 所具有的强烈负电荷产生的静电斥力的影响，费时、费能、增加脱磷酸、加磷酸的能量消耗 *4.后随链的冈崎片段虽然也是按照 5'-3’方向延伸，但其延伸方向却与先导链及复制叉的前进方向相反，DNA 复制系统是利用什么模型（ ）来克服这个矛盾的？回环模型*5、为什么肽链合成延伸方向是从氨基端到羧基端，而不是相反方向？ （PPT p77-78）答：用同位素标记合成的多肽可以证实合成的方向.在血红蛋白合成开始后,加入用 3H 标记的氨基酸,待反应进行一定阶段后,用胰蛋白酶降解血红蛋白,得到许多小肽.用“指纹法”检查标记氨基酸在 小肽内的分布情况,发现放射性氨基酸的含量是羧基端远远高于氨基端,并且从氨基端至羧基端的放射性逐渐增加.这说明血红蛋白的合成方向是从氨基端开始向羧基端延伸的6、氨基酸与 tRNA 之间的负载专一性是如何实现的？（PPT p119-131）a）氨基酰 tRNA 合成酶（AARS ）对氨基酸的特异识别与结合 （双晒作用）b）在 AARS 的介导下，tRNA 的副密码子(paracodon)决定了 AARS 对 tRNA 的准确识别与结合，从而保证了 tRNA 对氨基酸的准确负载。

7、葡萄糖对乳糖操纵子的影响？PPT p45-53 （会解释说明 p53 的图）葡萄糖影响 cAMP 水平，从而影响 CAP 活化与否，从而影响启动子上游 CAP-cAMP 正控制位点能否被激活 （按照这个思路展开）*8、色氨酸操纵子除了可阻遏的负控制系统外，还受什么机制控制？• 弱化机制（衰减机制） ，是一种转录-翻译偶联调控的机制当培养基中色氨酸浓度高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在 4 区被转录之前，核糖体就到达 2 区，这样使 2-3不能配对，3-4 区可以自由配对形成茎- 环状终止子结构，转录停止，trp 操纵子中的结构基因被关闭而不再合成色氨酸当培养基中色氨酸的浓度很低时，负载有色氨酸的 tRNATrp 也就少，这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢，当 4 区被转录完成时，核糖体才进行到1 区（或停留在两个相邻的 trp 密码子处） ，这时的前导区结构是 2-3 配对，不形成 3-4 配对的终止结构，所以转录可继续进行，直到将 trp 操纵子中的结构基因全部转录所以，弱化子对 RNA 聚合酶的影响依赖于前导肽翻译中核糖体所处。

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