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人瘦素(Human Leptin) ELISA检测试剂盒 Human Leptin ELISA Kit

来源:泰然健康网 时间:2024年12月26日 15:50

瘦素是一种由脂肪细胞分泌产生的蛋白质类激素,它通过抑制饥饿来帮助调节能量平衡,被称为“饥饿激素”的胃饥饿素可拮抗瘦素发挥作用。瘦素分子量为16 kDa,是由146个氨基酸残基组成的非糖基化蛋白,人瘦素与小鼠和大鼠的同源性分别为87%和84%,且人瘦素在小鼠和大鼠中可发挥生物学活性。瘦素主要产生于白色脂肪组织的脂肪细胞,也由褐色脂肪组织、胎盘、卵巢、骨骼肌、胃、乳腺上皮细胞、骨髓、胃主细胞和P/D1细胞产生。瘦素的表达情况受体内激素、细胞因子及营养状态影响,如参与正能量平衡的胰岛素和糖皮质激素可促进瘦素表达,而参与负能量平衡的儿茶酚胺则抑制瘦素的表达。在肥胖人群中,瘦素的敏感性降低,导致在能量储备高的情况下无法察觉饱腹感。

翌圣Human Leptin ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆、细胞培养上清中的人瘦素(Human Leptin)。特异性抗人瘦素抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的人瘦素与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中人瘦素的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 - 630 nm)测定吸光度值。

产品信息

货号

97036ES48 / 97036ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

15.63-1000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

检测时长

5小时

灵敏度

0.586 pg/mL

稀释线性

81.9 - 96.1 %

回收率

73.9 - 106.9%

板内差

2.9%

板间差

3.6%

实验数据

标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。

标准曲线图

灵敏度检测

人瘦素的最低检测限为0.586 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定20次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

20

20

20

30

30

30

平均值

14.8

98.1

521.1

14.9

98.5

522.4

标准差

0.8

1.4

8.5

1.1

1.9

8.7

变异系数(%)

5.7

1.5

1.6

7.1

1.9

1.7

回收率检测

  通过不同水平的人瘦素添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

91.7

77.5-106.9

血浆

89.0

75.8-105.3

细胞培养上清

87.9

73.9-101.5

稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

91.1

89.6-92.3

1:04

86.9

85.6-88.6

1:08

86.9

85.8-88.1

1:16

91.7

90.7-93.7

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

91.2

90.6-92.1

1:04

86.2

82.7-88.2

1:08

84.3

82.2-85.5

1:16

91.7

90.7-93.4

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

89.2

86.8-93.8

1:04

85.4

83.1-88.5

1:08

86.7

81.9-92.3

1:16

94.6

93.2-96.1

样本

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

10

7560.0

645.8-19580.0

肝素血浆

10

9461.5

21.9-20524.6

EDTA血浆

10

11340.4

4056.9-32826.0

枸橼酸钠血浆

10

5240.5

1325.3-15307.8

细胞培养上清

10

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内的15.63 pg/mL。

测定特异性

本试剂盒识别天然和重组人瘦素。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant mouse:

Recombinant rat:

IFN-γ

IL-17A

IFN-γ

IFN-γ

IL-1β

IL-18

IL-1β

IL-1β

IL-2

IL-21

IL-2

IL-4

IL-4

IL-22

IL-4

IL-6

IL-5

IL-23

IL-6

IL-10

IL-6

MCP-1

IL-10

TNF-α

IL-8

TGF-β1

IL-17A

IL-10

TNF-α

TNF-α

IL-12

VEGF

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