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氧化应激型脱发及防脱体外评价

来源：泰然健康网时间：2024年12月28日 08:59

随着臭氧层的破坏，紫外线辐射不断增强，且环境污染加重，越来越多的因素诱发体内自由基的产生。机体可通过抗氧化机制来维持自身的氧化平衡。在病理状态或外界刺激下，当氧化应激产生的损伤超过抗氧化体系的修复能力时，氧化平衡的稳态被破坏。

氧化应激参与许多生理状态及疾病，而越来越多的证据表明，氧化应激是诱导真皮毛乳头细胞衰老甚至脱发的重要病因之一。

今天的文章，我们主要阐述如何评价针对氧化应激型脱发的防脱活性物。

体外防脱功效体系

测试模型——毛乳头细胞

毛乳头细胞位于毛囊底部，与表皮毛基质细胞共同构成毛球部，位于真皮的毛乳头细胞与表皮毛基质的相互作用是毛发生长与脱落的关键（如图1），从而促进毛发的生长。

另外毛囊的生长是具有周期性的，其中生长期是毛囊生长最旺盛的时期，生长期的持续时间决定了毛发的长度和毛发的稀疏。这个阶段毛球部细胞表观变大，细胞快速增殖。

然而生长期的毛乳头细胞和毛基质细胞很容易受到外界因素的影响，如化疗、一些药物以及自由基等，从而导致处于生长期的毛发提前进入退行期，导致毛发脱落。

图1 真皮毛乳头与表皮毛基质的相互作用

刺激物——过氧化氢（H2O2）

H2O2是一种典型的氧化剂，也是体外实验常用的一种氧化应激反应的诱导物。它可以诱导机体产生氧化应激反应，形成大量的自由基，从而导致炎症反应、细胞活性等损伤。

例如H2O2诱导真皮毛乳头细胞早衰：Wen-YenHuang等人在建立体外细胞早衰模型时发现，H2O2能够诱导真皮毛乳头细胞（DPC）活性降低，诱导其早衰。真皮毛乳头细胞早衰后会影响生长期毛发的生长，使得处于生长期的毛发脱落。

图2 不同浓度H2O2处理1.5h后DPC存活率变化

阳性对照

H2O2能够诱导毛乳头细胞产生氧化应激，诱导炎症因子的产生，同时会导致毛乳头细胞衰老，影响其增殖。根据多指标多阳标的原则，设立阳性对照物如下：

① 米诺地尔：

米诺地尔原本主要用于治疗顽固性高血压，在使用过程中发发现，服用了米诺地尔的患者出现了毛发增多、增粗现象，从而启发了临床医生将其应用于脱发治疗。

米诺地尔治疗脱发主要从改变毛发生长周期、舒张血管、开放钾离子通道和激活Wnt/β-catenin信号通路出发。血管内皮生长因子（VEGF）与毛乳头细胞增殖密切相关，VEGF与其受体结合后，可以发挥多种生物学功能，如：促进血管内皮细胞分裂增殖，增加血管通透性等等。因此检测血管内皮生长因子（VEGF）时可将米诺地尔作为阳标。

②维生素E

机体的抗氧化系统分为抗氧化酶和非酶抗氧化分子，前者包括超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化酶等；后者包括维生素E、维生素C、谷胱甘肽和辅酶Q10等。

维生素E具有强氧化性，可以有效清除活性氧，终止自由基的形成。因此在检测ROS生成量时可将其作为阳标。

③地塞米松

地塞米松作为糖皮质激素（GC）的代表之一，被广泛应用于治疗炎症性疾病、自身免疫性疾病和过敏性疾病以及防止移植排异反应。

多项研究表明，地塞米松可通过抑制多条炎症通路包括NF-κB通路的表达，从而抑制IL-1α、IL-1βIL-6等多种炎症因子的表达，从而发挥其抗炎作用。因此在检测炎症因子表达量时，可将地塞米松作为阳标。

基于H2O2-DPC的防脱功效评估

用H2O2-DPC模型评价防脱功效，我们可以从H2O2诱导氧化应激、炎症反应的角度出发，通过相应的指标检测，评价活性物或产品的防脱功效：

VEGF

VEGF是血管内皮生长因子，毛囊底部含有大量的血管，是毛发生长的关键，另外毛乳头细胞也会分泌大量的VEGF，从而供给表皮毛基质，保障毛发的健康生长。

图3 VEGF含量检测结果（博溪生物）

从图中可以看出，sample组VEGF的表达量与NC组相比上升极显著，说明样品可以促进VEGF的表达，从而促进毛乳头细胞增殖，达到防脱功效。

ROS含量

H2O2可以诱导氧化应激反应，从而诱导ROS的产生，如果样品能够阻断或减缓反应，降低ROS含量，那么我们可以认为活性物具有一定的防脱功效。我们以VE为阳性物来进行检测：

图4 ROS含量检测结果（博溪生物）

从图中可以看出，相较于NC组，sample组的ROS含量下降极显著，活性物对于氧化应激反应有极显著的抑制效果，即活性物有一定的防脱功效。

炎症因子含量

炎症反应也广泛地参与了AGA的发生和发展。H2O2可以诱导炎症反应的发生，那么我们就可以通过检测炎症因子含量，来评价活性物的防脱功效。以IL-6为例：

图5 IL-6含量检测结果（博溪生物）

结果表明，相较于NC组，sample组的IL-6含量下降显著，活性物有抑制炎症反应的效果。

对于H2O2-DPC防脱功效评价就介绍到这里，除此以外，我们同样可以基于毛乳头细胞，以DHT为刺激物造模进行体外防脱功效评价。以上对于防脱功效的体外评价方法，适用于前期的原料筛选和化妆品配方开发及改良。

而《化妆品功效宣称评价规范》中规定了，宣称具有防脱功效，必须要进行人体实验，人体防脱功效评价参考《防脱发化妆品防脱功效评价方法征求意见稿》来进行，在此不再详述。

将防脱功效评价梳理梳理如下：

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参考文献

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