tRNA 氨基酰化的无标记检测,Genes

tRNA 的氨酰化产生一种氨酰-tRNA (aa-tRNA)，它对核糖体上的蛋白质合成有活性。tRNA 氨酰化的定量对于理解特异性机制和 aa-tRNA 进入蛋白质合成机器的流量至关重要，这决定了细胞的生长速度。用于量化 tRNA 氨酰化的传统测定涉及放射性，无论是使用放射性氨基酸还是使用 [3'-32P] 标记的 tRNA。我们在此描述了一种无标记检测，该检测通过生物素化-链霉亲和素 (SA) 与 aa-tRNA 上氨酰基的 α-胺或 α-亚胺结合来监测氨酰化。偶联的 aa-tRNA 产物很容易通过变性聚丙烯酰胺凝胶与未反应的 tRNA 分离，从而可以对氨酰化进行定量测量。这种无标记检测适用于广泛的氨基酸和 tRNA 序列以及两类氨酰化。它比使用放射性氨基酸的检测更灵敏、更稳健，并且比使用 [3'-32P] 标记的 tRNA 检测有可能探索更广泛的 tRNA。这种无标记检测报告的氨酰化动力学参数与使用放射性氨基酸报告的相似，表明其广泛适用于与人类健康和疾病相关的研究。

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相关知识

精氨酰tRNA合成酶抗体
为氨基酰－tRNA和核糖体A位结合所必需的是（)。
氨基酰
细胞化学词汇氨酰tRNA
原核生物蛋白质合成时的起始氨酰－tRNA是（）。
Mol Ther Nucleic Acids:氨基酰
真核生物中起始氨基酰
原核生物翻译起始氨基酰
与人类疾病相关的几种线粒体氨基酰
研究实现正交氨酰

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