石崖茶类黄酮的提取及其生理活性的研究
石崖茶类黄酮的提取及其生理活性的研究
石崖茶是一种具有很高药用价值的珍稀野生茶叶,类黄酮物质含量大于20%,明显高于其他植物。民间常用来治疗各种疾病,但对它的开发利用缺少科学的理论依据,因此,开展对石崖茶类黄酮的深入研究,具有重要的开发前景和实用意义。 本文分别对石崖茶类黄酮的提取工艺,分离纯化与结构分析,包括体外抗氧化活性、体外抗肿瘤、体内抗氧化及对免疫调节功能的影响等生理活性多方面进行研究。 对石崖茶类黄酮的提取研究中采用溶剂提取法、微波提取法和纤维素酶法提取三种方法,提取所得石崖茶类黄酮得率分别可达30.4%、35.2%和33.2%,其中采用微波法提取得率最高,且大大节省了提取时间,提高效率,是一种理想的提取方法。 利用大孔树脂柱层析法对石崖茶类黄酮粗提物进行了纯化研究,并对乙醇浓度、洗脱速度和洗脱终点等影响石崖茶类黄酮粗提物纯化的因素进行研究,得出较佳的纯化工艺参数为:乙醇浓度30%、洗脱速度为2ml/min、洗脱体积比为25:1。经纯化的石崖茶类黄酮纯度可达81%。 分别采用Fenton体系和邻苯三酚自氧化法测定了类黄酮对OH·和O_2~-·的清除能力,结果显示类黄酮是一种具有较强活性的抗氧化剂。其中清除羟自由基活性较强,清除率达67.2%。 体外抗肿瘤实验结果证实,石崖茶类黄酮具有较强的抑制人宫颈癌(Hela)细胞和食管癌(ec109)细胞生长的作用,当纯化类黄酮浓度为50(μg·ml~(-1))时,对ec109细胞的抑制率可达35%,而对hela细胞的抑制率可达60%。 小鼠实验结果证实,石崖茶类黄酮能显著的提高超氧化物岐化酶(SOD)活力和降低肝匀浆中过氧化脂质(LPO)含量,有明显的体内抗氧化及增强机体免疫功能的作用。
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